第一节溶血的一般检验
一、贫血概述
1、贫血定义：多种原因引起外周血单位容积内，血红蛋白（Hb）浓度，红细胞（RBC）计数，血细胞比容（HCT）低于本地区、相同年龄、性别的人群的参考下限的一种症状。
2、贫血形态学分类：
3、贫血病因学分类：
（1）、红细胞生成减少：骨髓造血功能障碍：再障；造血原料缺乏或失利用：缺铁贫、巨幼贫、铁粒幼贫。
（2）、红细胞破坏过多：溶贫
（3）、红细胞丢失过多：急、慢性失血
4、贫血临床表现：（了解）
一般表现：疲乏、无力、皮肤、黏膜和甲床苍白。
心血管及呼吸系统：心悸、心率加快、呼吸加深；
神经系统：头晕、目眩、耳鸣等；
消化系统：食欲减退、恶心、消化不良等；
泌尿生殖系统：肾脏浓缩功能减退等；
特殊表现：溶贫常见*疸、脾大等。
二、溶血性贫血的检验
（一）、概述
1、溶贫的定义与分类：
（1）、定义：由于某种原因，使红细胞存活期缩短，破坏增加，超过骨髓代偿能力引起的一类贫血。
（2）、分类：
按病因学分类：
红细胞内在缺陷所致（遗传/先天）：
膜、酶、珠蛋白结构等因素引起；
红细胞外在因素所致（获得性）：
免疫因素、膜缺陷、物理/化学因素等。
2、确定有无溶血：临床表现常有：贫血、*疸、脾大
（二）、溶贫的筛查项目与应用
1、游离血红蛋白的测定：
（1）、原理：血红蛋白可催化H2O2释放新生态氧，使联苯胺氧化为蓝紫色，颜色深浅反应其含量。
（2）、参考值：?40mg/L
（3）、临床意义：血管内溶血（显著增）、珠蛋白生成障碍性贫血、自免溶贫（轻度增）、红细胞膜缺陷时（不增）
2、血清结合珠蛋白（HP）的测定：
（1）、原理：待测血清中加入一定量的血红红蛋白液，与血清中HP结合，形成HP-Hb复合物，电泳分离复合物与未结合的Hb，测定复合物含量，从而得到HP的量。
（2）、参考值：0.8-2.7g/L
（3）、临床意义：
增：妊娠、慢性感染、恶性肿瘤等；
降：溶血、肝病、巨幼贫等。
3、血浆高铁血红素白蛋白测定：
临床意义：血管内溶血：阳性（+）
4、血红蛋白尿：
临床意义：血型不合输血、恶性疟、遗传性或继发性溶贫。
5、尿含铁血*素实验：
临床意义：慢性血管内溶血（+）
（三）、红细胞膜缺陷检验
1、红细胞膜
（1）、膜组成与结构：
膜包含：脂类、蛋白质、糖类
膜主要蛋白：主体蛋白、外周蛋白
（2）、膜功能：维持RBC的形态与变形性、物质运输、膜上受体、免疫功能、承载血型抗原、维持输血、凝血平衡。
（3）、影响因素:膜蛋白有遗传缺陷、化学因素（氧化损伤）、免疫因素、代谢异常等。
2、膜缺陷检验与应用
检验方法：
（1）、红细胞渗透脆性实验：
参考值：开始溶血：0.42%-0.44%（NaCl液）
完全溶血：0.32%-0.0.34%（NaCl液）
临床意义：
增：球形/椭圆形细胞增多症
降：阻塞性*疸、珠蛋白生成障碍性贫血、缺铁贫
（2）、自身溶血实验及纠正实验：（PNH本实验常：正常）
参考值：正常人红细胞孵育48h，不加纠正物的溶血率?3.5%，加葡萄糖的溶血率?1.0%，加ATP纠正物的溶血率?0.8%。
临床意义：
遗传性球形红增多症：加葡萄糖或ATP明显纠正
G-6-PD缺乏等戊糖旁路代谢缺陷症：加葡萄糖或ATP能纠正
丙酮酸激酶缺乏症：加葡萄糖不能纠正，ATP能纠正
（3）、酸化甘油溶血实验（AGLT）
参考值：正常人AGLT50?s
临床意义：
遗传性球形红缩短、自免溶贫、肾衰、妊娠等亦可缩短。
（4）、蔗糖溶血实验：（PNH的简易重要筛查实验）
参考值：定性实验：正常阴性
定量实验：正常溶血率?5%
（5）、酸化血清溶血实验（Hamtest）：（PNH的确诊实验）
参考值：正常阴性
（四）、红细胞酶缺陷检验：
1、红细胞酶代谢与功能：
维持红细胞代谢的酶类：
与糖有关的酶类：丙酮酸激酶（PK）、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PD）等。
谷胱甘肽还原酶系统、高铁血红蛋白还原酶系统
2、膜缺陷的相关检验：
（1）、高铁血红蛋白实验：（作为筛选实验）
参考值：正常人还原率?75%
临床意义：
G-6-PD缺乏时，其还原率下降。
（2）、变形珠蛋白小体检查：（G-6-PD缺乏的筛选实验）
参考值：正常人含有珠蛋白小体≧5个的红细胞一般?30%
临床意义：
G-6-PD缺乏时常?45%
（3）、红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶检测：
参考值：正常人有很强的荧光
临床意义：
G-6-PD缺乏时荧光很弱或无荧光
G-6-PD活性检测：G-6-PD缺陷者确诊实验
（4）、丙酮酸激酶测定：（PK严重缺乏者荧光60min不消失）
参考值：正常荧光在20min内消失
PK活性检测：PK缺陷者确诊实验
（五）、自免溶贫及实验室诊断：
1、自免溶贫的检测与临床应用：
1）、定义：
由于抗体或者补体等参与的溶血反应所致的贫血。
2）、免疫性溶血性贫血分类：
分类
抗体型别
自免溶贫
温反应性抗体型
冷反应性抗体型
冷凝集素综合征
PNH
通常温抗体，以IgG为主
温抗体IgG为主
通常为IgG
均为IgM
一般IgG
药物免疫性溶血
免疫复合型、IgM、IgG
同种免疫
新生儿溶血
血型不合输血
ABO、Rh、MN型
ABO、Rh型
2、抗球蛋白实验（Coombs实验）：主要检测自身抗体IgG
1）、直接抗球蛋白实验：检测红细胞表面有无不完全抗体
2）、间接抗球蛋白实验：检测血清中有无不完全抗体
参考值：阴性
临床意义：
阳性：自免溶贫、冷凝集素综合征、PCH、输血引起的溶贫等。
3、冷凝集素实验：
临床意义：阳性见于冷凝集素综合征（?1：）
4、冷热溶血实验：
临床意义：PCH患者阳性，冷反应抗体（D-L抗体）效价可?1：40，病*感染可出现阳性反应。
end
NO.2
JUNE
30.
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