摘要：天然存在的调节性T细胞（nTregs）在自身免疫性溶血性贫血的小鼠模型中的免疫耐受和控制免疫介导的病理学中起重要作用。我们的目的是检测特发性自身免疫性溶血性贫血（wAIHA）患者外周血单个核细胞（PBMC）培养物中的nTregs和白介素IL-10和IL-12的水平，以试图阐明发病机制背后的一些谜团。方法：对27例特发性wAIHA和15位年龄和性别匹配的健康患者进行了CD4+CD25highFoxP3+T细胞（nTregs）的流式细胞分析，并用酶联免疫吸附试验检测PBMC培养上清液中IL-10和IL-12的含量。结论：患者外周血中循环CD4+nTreg的平均（SD）百分比4.63%(1.0%)显着低于对照组(9.76%[0.78%])(P0.)。与对照组相比，患者的PBMC的水平IL-10和IL-12显著高于对照组，体外对LPS的反应性明显低于对照组，百分比之间着负相关。nTregs和网织红细胞计数（RC），对照IL-10和LPS刺激的IL-10的变化，与触珠蛋白（Hp）呈显着正相关(P0.05)。对照IL-10和LPS刺激的IL-10与RC呈正相关(P0.)，与Hp呈负相关(分别为P0.01和P0.05)。结果：nTreg的百分比和IL-10/IL-12失衡可能在该AIHA的发作和/或维持中起重要作用。
结论1：27例特发性wAIHA和15位年龄和性别匹配的健康患者作为对照组参与了这项研究。两组临床及常规实验室资料汇总见表1。两组年龄、性别差异无统计学意义，但Hp、RC、胆红素、乳酸脱氢酶、幽门螺杆菌差异有高度显著性(P0.)。首先分析来自患者和对照组的PBMC中CD4+CD25+FoxP3+T细胞在CD3+CD4+T细胞总数中的频率(图1)。然后用MFI测定nTregs(CD25high)的百分比。结果显示，CD4+细胞中nTreg细胞的百分率明显降低。患者组外周血细胞计数为4.63%[1.0%]，对照组为9.76%[0.78%]，差异有统计学意义(P0.)。
结论2：IL-10和IL-12主要由单核细胞分泌，而不是T细胞。我们检测LPS刺激(LPS优先刺激单核细胞)前后RPMI培养液中这些细胞因子的水平。刺激前，患者PBMC的IL-10水平明显高于对照组([19.1]vs18.4[1.9]，P0.)。在刺激下，患者组([])和对照组([88])的水平分别增加了6倍([])和70倍([88])，缩小了两组之间的差异(P0.05)(表2)。患者组(P0.01)和对照组(P0.)的LPS刺激后水平均显著高于基础水平(P0.01)。在未刺激的培养液中，患者组IL-12的产生(1.2[0.3])显著高于对照组(0.46[0.06])(P0.01)(表2)。而在LPS刺激的培养液中，患者组和对照组之间差异无显著性意义(1.59[0.62]vs2.40[0.3])(P=0.26)。对照组在LPS刺激前后的水平差异有统计学意义(P0.)，而患者组无显著性差异(P=0.17)(表4)。
结论3：在未刺激的培养液中，患者组IL-12的产生(1.2[0.3])显著高于对照组(0.46[0.06])(P0.01)(表2)。而在LPS刺激的培养液中，患者组和对照组之间差异无显著性意义(1.59[0.62]vs2.40[0.3])(P=0.26)。对照组在LPS刺激前后的水平差异有统计学意义(P0.)，而患者组无显著性差异(P=0.17)(表4)。
相关性分析：患者组nTregs百分率与RC呈显著负相关(P0.05)，nTregs百分率与Hp呈显著正相关(P0.05)。IL-10水平(基础水平和LPS刺激水平)与nTregs百分比呈显著负相关(P0.05)。RC与基础IL-10和LPS刺激的IL-10呈显著正相关(P0.)，而Hp与基础IL-10和LPS刺激的IL-10呈显著负相关(P0.01和P0.05)(图2和图3)。基础IL-10、LPS刺激的IL-10、nTregs百分比与血红蛋白、血清胆红素、乳酸脱氢酶水平无明显相关性。基础或LPS刺激的IL-10与所研究的任何其他参数均无显著相关性。最后，在对照组中，没有观察到有统计学意义的相关性。
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